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Matrigel matrix丨康寧基質膠使用指南-2

Matrigel matrix丨康寧基質膠使用指南-1


14. Corning? Matrigel? matrix可以反復凍融嗎?

建議用戶第一次融化后按照單次用量進行分裝,保存。


15. 為什么細胞沒有貼壁?Matrigel 也脫落了?

首先需要檢查細胞的接種濃度是否過高,Corning Matrigel的用量應等同于細胞培養體系中培養基的用量。如果Corning? Matrigel? matrix被稀釋到過低的濃度,形成的膠體容易從組織培養器皿表面分離。


16. 未稀釋的Corning? Matrigel? matrix中出現的沉淀應該怎么樣處理?

4°C下低速離心,去除沉淀物 。


17. 未使用完的Corning? Matrigel? matrix應該怎樣保存的?

與細胞培養基或緩沖液混合過但未使用完的Corning? Matrigel? matrix,不建議保留再用。


18. Corning? Matrigel? matrix中含有 DNA和/或RNA嗎?

是的。Corning? Matrigel? matrix沒有經過DNA酶或RNA酶消化處理,可能會含有痕量的DNA、RNA。


19. Corning? Matrigel? matrix中有血管內皮生長因子(VEGF)和金屬蛋白酶(MMPs)嗎?

在標準濃度的Corning? Matrigel? matrix中含有 5.0-7.5 ng/mL 的血管內皮生長因子( VEGF),GFR Corning? Matrigel? matrix中VEGF含量為1.0-1.5 ng/mL。另外,可能含有老鼠腫瘤細胞來源的痕量金屬蛋白酶(MMPs)。


20. Corning? Matrigel? matrix中有 LDEV嗎?

沒有的。Corning? Matrigel? matrix經免疫方法及PCR方法檢測,并不含有乳酸脫氫酶增高病毒(LDEV)或者乳酸脫氫脢增生病毒(LDHV) 。此外,我們還針對小鼠群體及腫瘤來源篩查了其他種類的病毒。詳細信息請參見產品說明書。


21. Corning? Matrigel? matrix中有尿素嗎?

沒有的。在Corning? Matrigel? matrix生產準備過程中使用過尿素,后續流程中經過透析方法已經去除了。


22. Corning? Matrigel? matrix中使用的什么緩沖液?

低葡聚糖 DMEM (1g/L),其中包含 50 μg/mL 慶大霉素。


23. Corning? Matrigel? matrix 中含有纖維連接蛋白(Fibronectin)嗎?

是的,通過使用Western Blot檢驗,我們在Matrigel matrix中發現了微量的纖維連接蛋白(Fibronectin)


24. Corning? Matrigel? matrix 中含有玻璃體結合蛋白( vitronectin)嗎?

某些EHS組織中可能含有微量的血液,因此Corning? Matrigel? matrix中可能會有痕量的玻璃體結合蛋白(Vitronectin) 。


25. Corning? Matrigel? matrix 中還有什么別的物質?

Corning? Matrigel? matrix 中還可能含有濃度小于 0.02%的三氯甲烷,以及腫瘤細胞的產生的其他未知蛋白或分子。


26. 提取過程會引起層粘連蛋白變性嗎?

不會的,不會引起層粘連蛋白變性。


27. Corning? Matrigel? matrix 可以儲存在 -70℃嗎?

是的。Matrigel matrix 可以儲存在-70℃。建議客戶將整瓶的 Matrigel matrix 進行分裝,儲存于聚丙烯或其他可以耐受超低溫條件材質的小管中,方便保存和使用。


28. Corning? Matrigel? matrix 的折射率是多少?

20°C 條件下,Corning? Matrigel? matrix 的折射率是 1.3406 到 1.3407,相對折射率為1.0056(同等條件下,水的折射率為 1.333)。


29. Corning? Matrigel? matrix 會有自發熒光嗎?

Corning? Matrigel? matrix 是一種蛋白混合物,經過透析處理后溶解在 DMEM 培養基中。為防止微生物污染,培養基中添加了慶大霉素。所以 Corning? Matrigel?matrix 可能引發熒光的組分包括其中的蛋白質成分,維生素成分以及慶大霉素(氨基糖苷類抗生素)。如果需要使用熒光檢測細胞生長狀態,建議使用者建立對照實驗,在所需要的波長條件下進行對比,以便排除背景熒光。


30. 使用 Matrigel 培養的細胞,如果需要進行切片或者免疫組織化學及免疫熒光檢驗,該怎樣固定呢?如何避免解聚?

可以使用 2%濃度的多聚甲醛進行固定。為避免固定后出現解聚的情況,可以加入 1%濃度的戊二醛。戊二醛作為固定劑,常用于電鏡觀察。如果用戶需要進行免疫熒光檢驗,加入戊二醛后,會出現明顯的背景熒光。為了解決這一問題,我們建議用戶在固定之后,使用 NaBH4 進行淬滅。NaBH4 極易氣泡,進行該步驟時,必須在水平操作臺上小心操作,避免晃動,盡量減少氣泡的形成。另外,用戶也可以嘗試使用較低濃度的戊二醛進行固定,如 0.1%到 0.5%,濃度越低,背景熒光信號越少。




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